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大鼠滑膜細胞的提取方法已整理好,拿走不謝!

更新時間:2022-07-20點擊次數:2087
  大鼠滑膜細胞分離自滑膜組織?;そM織是位于關節腔內面的內襯結構,各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構,同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。
  
  滑膜細胞是構成滑膜層的細胞群體,是維持關節正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內有分散的纖維分布。
  
  目前已經建立的大鼠滑膜細胞分離培養方法多以酶消化法為主,分離得到的細胞純度不高,并且培養時間較長。下面小編就分享滑膜細胞的提取方法。
  
  1、大鼠經麻醉,腹主動脈取血處死后,用酒精對膝關節進行局部消毒,于膝關節正中縱行切開皮膚,分離肌肉,露出膝蓋骨,繼續向下分離,可見平滑光亮的滑膜組織,用手術剪分離關節囊的滑膜層和纖維層,然后取出滑膜,同法采集另一個膝關節滑膜。
  
  2、將滑膜放入裝有PBS的EP管中,上下顛倒清洗,棄去PBS,重復兩次。
  
  3、在EP管中用手術剪將滑膜盡量剪碎,用胰酶消化15~20min,加入2倍量的無血清培養基終止消化,去除培養基,再加入2倍量的培養基,將胰酶*除去。
  
  4、把滑膜移到25mLflask中,盡量使滑膜平鋪在瓶底,避免因重疊而貼壁不牢,易被培養基沖起,將flask直立放入細胞培養箱中孵育3h。
  
  5、取出flask,加入*培養基后,將flask平放于細胞培養箱中。
  
  6、隔日觀察組織貼壁情況。若有輕微污染,更換培養基,觀察。
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